Frakcjonowanie komórek - Cell fractionation
Frakcjonowanie komórek jest procesem do oddzielania składników komórkowych przy zachowaniu pojedynczych funkcji każdego składnika. Jest to metoda, która pierwotnie była używana w celu wykazania komórkową lokalizację różnych procesach biochemicznych. Inne zastosowania frakcjonowania subkomórkowego jest dostarczenie wzbogaconego źródła białka w celu dalszego oczyszczania i ułatwiają rozpoznanie różnych stanów chorobowych.
homogenizacja
Tkankę homogenizuje się zazwyczaj w buforze , który jest izotoniczny zatrzymać uszkodzenie osmotycznego. Mechanizmów homogenizacji obejmuje rozdrabnianie, mielenie, siekanie, zmiany ciśnienia, szok osmotyczny , zamrażanie-rozmrażanie, a ultradźwiękowych. Następnie próbki są przechowywane w niskiej temperaturze, aby uniknąć uszkodzenia enzymatycznej. To tworzenie jednorodnej masy komórek (homogenatu komórek lub zawiesiny komórek). Wiąże się to rozdrabnianie komórek w odpowiedniej pożywce, w obecności pewnych enzymów z właściwego pH, składu jonowego i temperatury. Na przykład, pektynazowym który trawi blaszka środkowa wśród komórek roślinnych.
Filtrowanie
Ten krok może nie być konieczne w zależności od źródła komórek . Zwierzę tkanki jednak może otrzymując tkanki łącznej, która musi być usunięta. Zazwyczaj filtracja osiąga się wlewając gazy lub z nuczy a filtrem ceramicznym odpowiednie klasy.
Oczyszczenie
Oczyszczanie prowadzi się przez wirowanie różnicowe - sekwencyjne wzrost wyników siły grawitacyjnej w sekwencyjnym rozdzielania organelli w zależności od ich gęstości .
Zobacz też
Nośniki do separacji komórek przez gęstość