Plama Kinyoun - Kinyoun stain
Metoda Kinyouna lub barwienie Kinyoun (metoda zimna), opracowana przez Josepha J. Kinyouna , to procedura stosowana do barwienia kwasoopornych gatunków bakterii z rodzaju Mycobacterium i Nocardia oraz rodzaju apicomplexan Cryptosporidium . Jest to odmiana metody opracowanej przez Roberta Kocha w 1882 roku. Niektóre gatunki bakterii mają w swoich ścianach komórkowych woskowy lipid zwany kwasem mikolowym, który pozwala im na barwienie kwasem szybciej niż barwnikiem Grama. Unikalna zdolność prątków do opierania się odbarwieniu przez kwaśny alkohol jest powodem, dla którego określa się je jako kwasoodporne. Polega na nałożeniu bejcy podstawowej ( fuksyna podstawowa ), odbarwiacza (kwasowo-alkoholowego) oraz barwnika kontrastowego ( błękit metylenowy ). W przeciwieństwie do barwienia Ziehl-Neelsena ( barwienie ZN), metoda barwienia Kinyoun nie wymaga ogrzewania. W barwniku Ziehla-Neelsena ciepło działa jak zaprawa fizyczna, podczas gdy fenol (karbol z fuschiny karbolowej) działa jak zaprawa chemiczna. Ponieważ barwienie Kinyoun jest metodą zimną (bez zastosowania ciepła), zwiększa się stężenie użytego karbolu fuschin.
| Stosowanie | Odczynnik | Kolor komórki | |
|---|---|---|---|
| Kwas szybko | Bezkwasowy szybki | ||
| Barwnik podstawowy | Fuksyna karbolowa | czerwony | czerwony |
| Odbarwiacz | Alkohol kwaśny | czerwony | Bezbarwny |
| Barwienie licznikowe | Błękit metylenowy | czerwony | Niebieski |
Procedura barwienia
Zrób plamę kwasoodporną
Materiały
- Szkiełko z rozmazem drobnoustrojów
- Fuksyna karbolowa
- Kwas-alkohol
- Błękit metylenowy
- bibuliczny papier
- Mikroskop
Instrukcje
- Zrób rozmaz na szkiełku z organizmami
- Oczyścić szkiełko, szkiełko z etykietą woskową, rozprowadzić organizm, wysuszyć na powietrzu przez 10 minut, utrwalić na gorąco
- Zanurz preparat w Carbol Fuchsin na 20 minut.
- Płukanie szkiełka
- Zanurz w kwaśnym alkoholu na 3-5 sekund.
- Płukanie Szkiełka
- Zanurz szkiełko w błękicie metylenowym na 30 sekund.
- Płukanie Szkiełka
- Osuszyć szkiełko bibulijnym papierem.
- Obserwuj pod mikroskopem.
Modyfikacja
Metodę Kinyouna można zmodyfikować jako barwienie słabo kwasoodporne, w którym zamiast kwasu solnego stosuje się 5% kwas siarkowy. Słabo kwasoodporny barwnik oprócz barwienia prątków spowoduje zabarwienie organizmów, które nie są w stanie utrzymać fuksyny karbolowej po odbarwieniu za pomocą HCl.
Zobacz też
Bibliografia
 |
Ten artykuł dotyczący mikrobiologii jest skrótem . Możesz pomóc Wikipedii, rozwijając ją . |