NK-92 - NK-92
NK-92 jest nieśmiertelnej linii komórkowej , który ma cechy i właściwości naturalnych zabójców (NK), że każda osoba krążącego we krwi. Komórki NK krwi i komórki NK-92 rozpoznają najeźdźców, takich jak wirusy i grzyby. Komórki NK-92, podobnie jak komórki NK krwi, mogą atakować komórki rakowe, jeśli guz nie wyrósł spod kontroli. Komórki NK-92 wyizolowano i scharakteryzowano w laboratorium Hansa Klingemanna w British Columbia Cancer Agency w Vancouver, Kanada. Komórki pochodziły od pacjenta z chłoniakiem z komórek NK , rzadkim typem chłoniaka . Chociaż sklonowano kilka innych linii komórek NK, tylko komórki NK-92 można namnażać do większej liczby i konsekwentnie zabijać komórki nowotworowe. Kiedy komórki NK-92 wiążą się z rakiem lub zakażoną komórką, wydzielają perforynę, która dziurawi komórki docelowe, a następnie granzymy, które indukują apoptozę w komórkach docelowych. Komórki NK-92 atakują również komórki rakowe poprzez układ ligandów Fas-Fas i są zdolne do wytwarzania cytokin, które same mogą zabijać komórki rakowe (takie jak TNF-alfa ) lub stymulować i rozszerzać inne komórki odpornościowe, takie jak interferon.
Koncesjonowanie
Linia komórkowa została licencjonowana przez NantKwest, Inc. i jest obecnie opracowywana w klinice do dożylnej terapii nowotworów hematologicznych i guzów litych, do miejscowego wstrzyknięcia do guza, jako komórki efektorowe do zabijania za pośrednictwem przeciwciał przez komórki zmodyfikowane CD16 oraz jako komórki efektorowe do zabijania specyficznego dla chimerycznego receptora antygenowego (CAR). Linia komórkowa została licencjonowana do zastosowań nieklinicznych firmie Brink Biologics oraz do zastosowań weterynaryjnych firmie Coneksis.
Autoryzowanym dystrybutorem NantKwest jest firma Brink Biologics, która udostępnia komórki NK-92 i pewne genetycznie zmodyfikowane warianty do testów laboratoryjnych i badań in vivo, w tym testów ADCC, które określają ilościowo udział ADCC w działaniu terapeutycznym przeciwciał monoklonalnych (Neukopanel firmy Brink Biologics) oraz do innych nieklinicznych zastosowań testowych.
W badaniach klinicznych
Trzy badania kliniczne I fazy, prowadzone przez ekspertów w dziedzinie immunoterapii adopcyjnej nowotworów, przyniosły do tej pory doskonałe wyniki. Hans Klingemann i Sally Arai ukończyli amerykańskie badanie w Rush University Medical Center ( Chicago ) u pacjentów z komórkami nerkowymi i czerniakiem, a dr Torsten Tonn i dr Oliver Ottmann ukończyli europejskie badanie na Uniwersytecie we Frankfurcie u pacjentów z różnymi chorobami litymi i hematologicznymi. nowotwory złośliwe. Armand Keating kompletuje ostatnią kohortę pacjentów w kanadyjskim badaniu w Princess Margaret Hospital w Toronto u pacjentów z chłoniakiem po autologicznym przeszczepie szpiku kostnego. We wszystkich trzech programach komórki NK-92 podawano jako prosty wlew dożylny, dawkowano dwa lub trzy razy na cykl leczenia i podawano w warunkach ambulatoryjnych.
Co najważniejsze, nie wystąpiły żadne działania niepożądane stopnia ≥ 2 podczas lub po krótkiej infuzji komórek NK-92. Maksymalna dawka podana w badaniu we Frankfurcie wynosiła 10e10 komórek/me2 x 2 infuzje w odstępie 48 godzin. W badaniu Chicago wstrzykiwano komórki NK-92 w maksymalnej ilości 5 x 10e komórek/me2 x 3 wlewy, co 48 godzin. Nie była to MTD, ale raczej liczba komórek, które można było namnażać w workach hodowlanych w ciągu trzytygodniowego okresu hodowli. Alternatywne technologie ekspansji komórek (bioreaktory) umożliwią dalsze zwiększenie liczby komórek NK-92 na mniejszej powierzchni. Anegdotyczne doniesienia o działaniu przeciwnowotworowym w dwóch zakończonych badaniach fazy I zaobserwowano u 6/11 pacjentów z rakiem nerki, 3/4 pacjentów z rakiem płuc i 1/1 pacjenta z czerniakiem, wszyscy z bardzo zaawansowaną chorobą. Oprócz stabilizacji choroby i regresji przerzutów w płucach i węzłach chłonnych , silny ból związany z przerzutami nowotworowymi u kilku pacjentów, który był oporny na standardową chemioterapię, został znacznie zmniejszony. Trwające badanie w Toronto dotyczy pacjentów z chłoniakiem, u których doszło do nawrotu choroby po autologicznym przeszczepie komórek macierzystych. Wstępne wyniki sugerują znaczną korzyść u kilku pacjentów.
Inżynieria genetyczna
Komórki NK-92 można poddać inżynierii genetycznej w celu rozpoznawania i zabijania ludzkich komórek nowotworowych. Limfocyty T zmodyfikowane chimerycznym receptorem antygenowym (CAR) są popularne w immunoonkologii, ponieważ wykazano, że infuzja tych zmodyfikowanych komórek może osiągnąć remisję u niektórych pacjentów z ostrą i przewlekłą białaczką . W przeciwieństwie do tego, komórki NK (zarówno z krwi obwodowej, jak i krwi pępowinowej) nie wzbudziły wystarczającego zainteresowania jako cytotoksyczne komórki efektorowe zaprojektowane przez CAR, ponieważ zakres ekspansji komórek NK może zależeć od dawcy i ponieważ wydajność transfekcji, nawet przy użyciu wektorów lentiwirusowych lub retrowirusowych , jest tylko umiarkowanie wydajny. Z drugiej strony komórki NK-92 mają przewidywalną kinetykę ekspansji i mogą być hodowane w bioreaktorach do miliardów komórek w ciągu kilku tygodni. Można je łatwo transfekować supernatantem wirusowym lub metodami fizycznymi. Nawet mRNA może być transportowane do komórek z dużą wydajnością.
Komórki NK-92 zostały również transfekowane receptorem Fc o wysokim powinowactwie (NK-92Fc), który jest głównym receptorem przeciwciał monoklonalnych wywołujących cytotoksyczność komórkową zależną od przeciwciał (ADCC), w tym rytuksymab i ofatumumab . W oparciu o ten wariant opracowano test zwany Neukopanel do ilościowego oznaczania ADCC przeciwciał monoklonalnych, technologię, która zwróciła uwagę wielu firm biotechnologicznych i farmaceutycznych, które stosują Neukopanel do określenia udziału ADCC ich przeciwciał monoklonalnych.