Bejca Papanicolaou - Papanicolaou stain
Barwienie Papanicolaou (również barwienie Papanicolaou i Barwienie Pap ) to multichromatyczna (wielokolorowa) technika barwienia cytologicznego opracowana przez George'a Papanicolaou w 1942 r. Barwnik Papanicolaou jest jednym z najczęściej stosowanych barwników w cytologii , gdzie jest używany do pomocy patologom w tworzeniu diagnoza. Chociaż najbardziej znaczący dla jego zastosowania w wykrywaniu raka szyjki macicy w próbie Pap lub wymazu , jest również stosowany do barwienia nie- ginekologiczny próbki preparatów z różnych wydzielin ciała i od małych biopsji igłowych narządów i tkanek. Papanicolaou opublikował trzy formulacje tej plamy w 1942, 1954 i 1960.
Stosowanie
Barwienie papu służy do różnicowania komórek w preparatach rozmazów (w których próbki są rozprowadzane lub rozmazane na szkiełku mikroskopowym) od różnych wydzielin ustrojowych i biopsji igłowych ; próbki mogą obejmować ginekologicznych rozmazy ( cytologiczne ), plwociny , szczotką, przemywanie, mocz , płyn mózgowo-rdzeniowy , płyn jamy brzusznej, płyn opłucnowy , płyn maziowy , płyn nasienny , aspiracji igłę cienką , próbki dotykowe guza lub innych materiałów sypkich, zawierających komórki.
Barwnik do papki nie jest w pełni znormalizowany i występuje w kilku formach różniących się dokładnymi zastosowanymi barwnikami, ich proporcjami i czasem trwania procesu. Barwienie Pap jest zwykle związane z cytopatologią, w której bada się luźne komórki, ale barwnik został również zmodyfikowany i użyty na skrawkach tkanek.
cytologia: wymaz Pap
Barwienie Pap jest stosowane w rozmazie Pap (lub teście Pap) i jest niezawodną techniką w badaniach przesiewowych raka szyjki macicy w ginekologii .
Uogólniona metoda barwienia
Klasyczna forma bejcy Papanicolaou to pięć bejc w trzech roztworach.
- Pierwszy roztwór do barwienia zawiera hematoksylinę, która barwi jądra komórkowe . Papanicolaou użył hematoksyliny Harrisa we wszystkich trzech recepturach opublikowanej przez siebie plamy.
- Drugi roztwór barwiący (oznaczony jako OG-6) zawiera Orange G w 95% alkoholu etylowym z niewielką ilością kwasu fosfowolframowego . W OG-6 OG oznacza Orange G, a „6” oznacza stężenie dodanego kwasu fosfowolframowego ; inne warianty to OG-5 i OG-8).
- Trzeci roztwór do barwienia składa się z trzech barwników, Eozyny Y , Jasnozielonego SF żółtawego i Brązu Bismarcka Y w 95% alkoholu etylowym z niewielką ilością kwasu fosfowolframowego i węglanu litu . Roztwór ten, oznaczony EA, po którym następuje liczba określająca proporcje barwników, inne preparaty obejmują EA-36, EA-50 i EA-65.
Barwniki kontrastowe rozpuszcza się w 95% alkoholu etylowym, co zapobiega nadmiernemu wybarwieniu komórek, które przesłaniałoby szczegóły jądra i kontury komórek, szczególnie w przypadku, gdy komórki zachodzą na szkiełko. Kwas fosforowolframowy jest dodawany w celu dostosowania pH barwników kontrastowych i pomaga zoptymalizować intensywność koloru. Barwnik kontrastowy EA zawiera brąz Bismarcka i kwas fosfowolframowy, które w połączeniu powodują wytrącanie obu składników z roztworu, skracając żywotność mieszaniny.
Wyniki
W wyniku barwienia komórki powinny być dość przezroczyste, aby można było zinterpretować nawet grubsze próbki z nakładającymi się komórkami. Jądra komórkowe powinny być ostre, od niebieskiego do czarnego, a wzory chromatyny w jądrze powinny być dobrze określone. Cytoplazma komórkowa barwi się na niebiesko-zielono, a keratyna na pomarańczowo.
Eozyna Y barwi powierzchowne komórki nabłonka płaskiego , jąderka , rzęski i czerwone krwinki . Jasnozielony SF barwi żółtawo cytoplazmę innych komórek, innych niż powierzchowne komórki płaskonabłonkowe. Powierzchowne komórki mają kolor od pomarańczowego do różowego, a komórki pośrednie i przypodstawne mają kolor od turkusowej do niebieskiej.
Ultraszybka barwa Papanicolaou
Ultraszybkie barwienie Papanicolaou jest alternatywą dla cienkoigłowych próbek aspiracyjnych, opracowaną w celu uzyskania porównywalnej przejrzystości wizualnej w znacznie krótszym czasie. Różni się proces uwadniania w suszonej powietrzem rozmazu z roztworem soli , należy 4% formaldehydu w 65% etanolu utrwalający , i stosowanie Richard-Allan hematoksyliną -2 i Cyto wybarwiania , w wyniku czego 90 drugiego procesu otrzymując przezroczyste polichromatyczne plam.
Przykłady barwienia Papanicolaou
Czerniak złośliwy , biopsja aspiracyjna cienkoigłowa wątroby , wymaz bezpośredni.
Rak płaskonabłonkowy , płukanie oskrzeli.
Rak brodawkowaty tarczycy , biopsja aspiracyjna cienkoigłowa.
Łagodna próbka cytologiczna moczu.
Artykuły George'a N. Papanicolaou opisujące jego plamę
- Papanicolaou, George N. „Nowa procedura barwienia wymazów z pochwy”. Science 95,2469 (1942): 438–439.
- Papanicolaou, George N. „Metoda rozmazu komórkowego w diagnozowaniu raka”. American Journal of Public Health and the Nation's Health 38,2 (1948): 202–205.
- Papanicolaou, George N. „Atlas cytologii złuszczającej”. Opublikowane dla funduszu Commonwealth przez Harvard University Press. (1954).
- Papanicolaou, George N. „Memorandum on barwienia”. Atlas cytologii złuszczającej. Cambridge, MA: Harvard University Press, Suplement II (1960): 12.
Zobacz też
- Diff-Quik - metoda barwienia Romanowskiego powszechnie stosowana w cytologii