Film krwi - Blood film

Film krwi
Rozmaz krwi obwodowej - zaplamiony i niezabarwiony.jpg
Dwa rozmazy krwi obwodowej typu push, odpowiednie do charakteryzowania elementów komórkowych krwi. Lewy rozmaz jest niezabarwiony, prawy rozmaz jest wybarwiony barwnikiem Wrighta-Giemsy.
ICD-9-CM 90,5
MedlinePlus 003665

Folii krwi -OR rozmazu krwi obwodowej -jest cienką warstwę krwi rozmazane na szklanym szkiełku mikroskopowym i barwiono w taki sposób, aby umożliwić różne komórki krwi do badania pod mikroskopem. Rozmazy krwi są badane w badaniach nad zaburzeniami hematologicznymi (krwi) i są rutynowo wykorzystywane do poszukiwania pasożytów krwi , takich jak malaria i filarioza .

Przygotowanie

Folie krwi przez umieszczenie kropli krwi na jednym końcu suwaka i za pomocą suwaka rozpraszacza do dyspergowania we krwi w długości zjeżdżalni. Celem jest uzyskanie regionu zwanego monowarstwą, w którym komórki są wystarczająco oddalone od siebie, aby można je było policzyć i zróżnicować. Monowarstwa znajduje się w „pierzastej krawędzi” utworzonej przez suwak rozprowadzający, który wciąga krew do przodu.

Nieplamiony rozmaz
Czysty
Poplamiony rozmaz
Wright-Giemsa barwiony
Zbliżenia na opierzone krawędzie rozmazów krwi. Blady środkowy pas gradientu to monowarstwa.

Szkiełko pozostawia się do wyschnięcia na powietrzu, po czym krew utrwala się na szkiełku przez krótkie zanurzenie w metanolu . Utrwalacz jest niezbędny do dobrego barwienia i prezentacji szczegółów komórkowych. Po utrwaleniu szkiełko jest barwione w celu odróżnienia komórek od siebie.

Rutynowa analiza krwi w laboratoriach medycznych jest zwykle wykonywana na rozmazach krwi wybarwionych barwnikami Romanowsky'ego, takimi jak barwnik Wright's , Giemsa lub Diff-Quik . Popularnym wyborem jest również bejca kombinowana Wright-Giemsa. Barwniki te pozwalają na wykrycie nieprawidłowości białych i czerwonych krwinek oraz płytek krwi . Hematopatolodzy często używają innych specjalistycznych barwników do pomocy w diagnostyce różnicowej zaburzeń krwi.

Po wybarwieniu monowarstwę ogląda się pod mikroskopem przy powiększeniu do 1000x. Poszczególne komórki są badane, a ich morfologia jest charakteryzowana i rejestrowana.

Znaczenie kliniczne

Normalny film z ludzkiej krwi
Film krwi w przewlekłej białaczce szpikowej
Lewy obraz przedstawia obraz mikroskopowy normalnego rozmazu krwi dorosłego, podczas gdy prawy obraz przedstawia rozmaz krwi od pacjenta z przewlekłą białaczką szpikową .

Badanie rozmazu krwi jest zwykle wykonywane w połączeniu z pełną morfologią krwi w celu zbadania nieprawidłowych wyników lub potwierdzenia wyników, które automatyczny analizator oznaczył jako niewiarygodne.

Badanie mikroskopowe kształtu, wielkości i zabarwienia czerwonych krwinek jest przydatne do określenia przyczyny niedokrwistości . Zaburzenia takie jak niedokrwistość z niedoboru żelaza , anemia sierpowata , niedokrwistość megaloblastyczna i mikroangiopatycznej niedokrwistość hemolityczna wyniku w charakterystycznych nieprawidłowości w filmie krwi.

Proporcje różnych typów białych krwinek można określić z rozmazu krwi. Nazywa się to ręcznym różnicowaniem białych krwinek . Różnicowanie białych krwinek może ujawnić nieprawidłowości w proporcjach typów białych krwinek, takich jak neutrofilia i eozynofilia , a także obecność nieprawidłowych komórek, takich jak krążące komórki blastyczne obserwowane w ostrej białaczce . W rozmazie krwi widoczne są również jakościowe nieprawidłowości białych krwinek, takie jak ziarnina toksyczna . Nowoczesne analizatory morfologii krwi mogą zapewnić automatyczne różnicowanie białych krwinek, ale mają ograniczoną zdolność do różnicowania niedojrzałych i nieprawidłowych komórek, dlatego często wskazane jest ręczne badanie rozmazu krwi.

Badanie rozmazu krwi jest preferowaną metodą diagnostyczną niektórych infekcji pasożytniczych, takich jak malaria i babeszjoza . Rzadko bakterie mogą być widoczne w rozmazie krwi u pacjentów z ciężką sepsą .

Malaria

Filmy krwi przedstawiające różne stadia rozwojowe pasożyta malarii Plasmodium falciparum , wybarwione barwnikami Wrighta i Giemsą .

Preferowaną i najbardziej wiarygodną diagnozą malarii jest badanie mikroskopowe rozmazów krwi, ponieważ każdy z czterech głównych gatunków pasożytów ma odrębne cechy. Tradycyjnie stosuje się dwa rodzaje rozmazu krwi.

  • Cienkie błony są podobne do zwykłych błon krwi i umożliwiają identyfikację gatunku, ponieważ w tym preparacie najlepiej zachowuje wygląd pasożyta.
  • Grube błony pozwalają mikroskopowi przebadać większą objętość krwi i są około jedenaście razy bardziej czułe niż cienka błona, więc wychwytywanie niskiego poziomu infekcji jest łatwiejsze na grubym błonie, ale wygląd pasożyta jest znacznie bardziej zniekształcony, a zatem rozróżnienie między różnymi gatunkami może być znacznie trudniejsze.

Na podstawie grubej warstwy doświadczony mikroskopista może wykryć wszystkie napotkane pasożyty. Diagnoza mikroskopowa może być trudna, ponieważ wczesne trofozoity („forma pierścieniowa”) wszystkich czterech gatunków wyglądają identycznie i nigdy nie jest możliwe zdiagnozowanie gatunku na podstawie pojedynczej formy pierścieniowej; identyfikacja gatunkowa zawsze opiera się na kilku trofozoitach.

Największą pułapką w większości laboratoriów w krajach rozwiniętych jest zbyt duże opóźnienie między pobraniem próbki krwi a wykonaniem rozmazów krwi. Gdy krew schładza się do temperatury pokojowej, męskie gametocyty dzielą się i uwalniają mikrogamety : są to długie, faliste nitkowate struktury, które można pomylić z organizmami takimi jak Borrelia . Jeśli krew będzie utrzymywana w wyższych temperaturach, schizonty pękną , a merozoity atakujące erytrocyty omyłkowo przyjmą postać acolé P. falciparum . Jeśli P. vivax lub P. ovale pozostawi się na kilka godzin w EDTA, nagromadzenie kwasu w próbce spowoduje kurczenie się zarażonych pasożytem erytrocytów i zwijanie się pasożyta, symulując pojawienie się P. malarii . Ten problem pogarsza się, gdy stosuje się antykoagulanty, takie jak heparyna lub cytrynian . Antykoagulantem, który sprawia najmniej problemów, jest EDTA . Zwykle stosuje się bejcę Romanowsky'ego lub bejcę wariantową. Niektóre laboratoria błędnie używają tego samego barwienia pH jak robią na filmach rutynowe badania hematologiczne krwi ( pH 6,8) Malaria filmy krwi muszą być barwione przy pH 7,2, lub plamki schüffnera i Jamesa kropki nie będą widoczne.

Procedury przechwytywania immunochromatograficznego (szybkie testy diagnostyczne, takie jak testy wykrywania antygenu malarii ) są niemikroskopowymi opcjami diagnostycznymi dla laboratorium, które może nie mieć odpowiedniej wiedzy z zakresu mikroskopii.

Bibliografia

Linki zewnętrzne