Monitorowanie obciążenia wirusem HIV - Viral load monitoring for HIV

Monitorowanie miana wirusa HIV to regularne pomiary miana wirusa u poszczególnych osób zakażonych wirusem HIV w ramach ich osobistego planu leczenia HIV/AIDS . Liczenie miana wirusa jest rutynowe przed rozpoczęciem leczenia HIV.

Rodzaje

Można zastosować różne testy wiremii. Jednym ze sposobów klasyfikacji testów jest to, czy jest to test kwasu nukleinowego, czy test nienukleinowy. Różnice w kosztach i czasie potrzebnym na uzyskanie wyniku mogą być czynnikami decydującymi o wyborze rodzaju użytego testu.

Zastosowania

Monitorowanie obciążenia wirusem jest wykorzystywane przez osoby zakażone wirusem HIV w celu opracowania planu ich osobistego leczenia HIV/AIDS .

Liczenie miana wirusa jest rutynowe przed rozpoczęciem leczenia HIV. Jeśli leczenie nie zostanie zmienione, miano wirusa jest monitorowane za pomocą testów co 3–4 miesiące w celu potwierdzenia stabilnego niskiego miana wirusa. Pacjenci, którzy są stabilni medycznie i mają niskie miano wirusa przez dwa lata, mogą otrzymywać miano wirusa co 6 miesięcy zamiast 3. Jeśli miano wirusa nie jest stabilne lub wystarczająco niskie, może to być powodem modyfikacji leczenia HIV. W przypadku zmiany leczenia HIV, miano wirusa należy zbadać 2–8 tygodni później.

Typowa interpretacja wyników

Wcześniejsze wytyczne dotyczące leczenia zalecały, aby każdy, kto ma miano wirusa powyżej 100 000 kopii/ml krwi, rozpoczął leczenie. Obecnie w Stanach Zjednoczonych standardem opieki jest rozpoczęcie leczenia antyretrowirusowego po wykryciu nosicielstwa wirusa HIV. HIV jest retrowirusem , wirusem RNA, który wnika do komórki gospodarza i wykorzystuje mechanizm replikacji DNA gospodarza oraz enzym odwrotną transkryptazę do wytwarzania DNA z genomu wirusowego RNA . HIV wytwarza również enzym integrazę, który jest używany do integracji nowo wytworzonego wirusowego DNA z DNA gospodarza. Wirus jest następnie replikowany za każdym razem, gdy replikuje się DNA komórki gospodarza. Ze względu na charakter wirusa leki stosowane w leczeniu HIV nazywane są lekami przeciwretrowirusowymi, a przebieg leczenia określa się mianem terapii przeciwretrowirusowej (ART). Te silne leki nie mogą wyleczyć osoby; mogą jednak poradzić sobie z wirusem i spowolnić postęp zakażenia HIV. Ścisłe przestrzeganie przepisanego schematu ART ma kluczowe znaczenie dla kontrolowania choroby.

Wysoce aktywna terapia antyretrowirusowa (HAART) jest obecnie zalecaną metodą leczenia HIV. HAART obejmuje przyjmowanie kombinacji (schematu) trzech lub więcej leków ART z co najmniej dwóch różnych klas leków. Istnieje sześć klas leków ART:

Każda klasa leków blokuje wirusa w inny sposób. Leczenie jest bardziej skuteczne w kontrolowaniu wirusa, gdy stosuje się kombinację leków z różnych klas. HAART zmniejsza również ryzyko rozwoju lekooporności. Testy obciążenia wirusem są wykorzystywane do monitorowania efektów ART, śledzenia supresji wirusa i wykrywania niepowodzeń leczenia. Skuteczna kombinacja ART powinna spowodować spadek miana wirusa o 1,5 do 2 log (30-100 razy) w ciągu sześciu tygodni, przy czym miano wirusa spadnie poniżej granicy wykrywalności w ciągu czterech do sześciu miesięcy.

Harmonogram monitorowania laboratoryjnego pacjentów stosujących ART:

Wstępna wizyta u lekarza Przed rozpoczęciem ART Rozpoczynanie lub modyfikowanie ART 2 – 8 tygodni po rozpoczęciu lub modyfikacji ART Co 3 – 6 miesięcy Co 6 – 12 miesięcy Inne
Wirusowe obciążenie Wchodząc pod opiekę Co 3 – 6 miesięcy Linia bazowa do porównania Powtarzać co 4 – 8 tygodni, aż miano wirusa spadnie do <200 kopii/ml krwi, a następnie co 3 – 6 miesięcy Osoby z obniżonym mianem wirusa, które są stabilne klinicznie i immunologicznie przez ponad 2-3 lata, mogą chodzić na co 6 miesięcy Niepowodzenie leczenia lub gdy jest to klinicznie wskazane
CD4 Wchodząc pod opiekę Co 3 – 6 miesięcy Linia bazowa do porównania Rutynowe monitorowanie U osób z obniżoną wiremią, które są stabilne klinicznie, monitorowanie liczby komórek CD4 może odbywać się co 6–12 miesięcy Niepowodzenie leczenia lub w sytuacji klinicznej

Wskaźnik liczby CD4

Monitorowanie obciążenia wirusem HIV uzupełnia liczbę CD4, która jest innym rodzajem testu związanego z monitorowaniem HIV. Powszechne jest zamieszanie co do tego, kiedy wykonać test CD4. Wyniki testu wiremii pomagają określić, kiedy wskazana jest liczba CD4. Komórki CD4 są głównym celem wirusa HIV. Test CD4 określa ilościowo limfocyty T Helper i jest często łączony z testem wiremii w celu monitorowania postępu HIV. Testy CD4 pokazują siłę układu odpornościowego, ale nie wykazują aktywności wirusa. Zgodnie z ustaleniami Centers for Disease Control and Prevention (CDC), osoba z HIV i liczbą komórek CD4 poniżej 200 lub CD4 poniżej 14% uważa się za chorą na AIDS . Podwyższona liczba komórek CD4 może wynikać z odpowiedzi immunologicznej na infekcję lub niedawnego szczepienia . Zmniejszona liczba CD4 w połączeniu z wyższymi wartościami w teście wiremii wskazuje na zwiększone ryzyko zachorowania na choroby oportunistyczne .

Skoki w danych

Podczas leczenia ART niektórzy pacjenci z niewykrywalnymi pomiarami miana wirusa mogą odczuwać wzrost miana wirusa do niskiego poziomu (zwykle poniżej 400 kopii/ml krwi), a następnie powrót do niewykrywalnego poziomu. Te przejściowe sygnały nie wskazują, że wirus rozwija oporność na terapię lekową. Pęcherze wydają się być częstsze w zimie, co sugeruje związek z chorobami, takimi jak przeziębienie i grypa. Migawki obciążenia wirusowego są częściowo wyjaśnione przez różne czynniki związane z pacjentem i uważa się, że są stosunkowo powszechne. Wysoki poziom i utrzymujący się wzrost miana wirusa są często związane z rozwojem lekooporności i/lub mutacji wirusowych i często dyktują zmiany w ART.

Populacje specjalne

Okres okna dla testu to czas od początkowego zakażenia do momentu wykrycia choroby. Narażenie na HIV, a następnie replikacja wirusa, może zająć nawet sześć miesięcy, aby osiągnąć poziom wykrywalny w wielu metodach badawczych. Badanie na przeciwciała HIV zwykle wykrywa HIV przeciwciała w ciągu dwóch do ośmiu tygodni, ale może mieć prawidłowy wynik negatywny dla długa jak 2 do 6 miesięcy po pierwotnym zakażeniu. Testy obciążenia wirusem mogą być również wykorzystywane do diagnozowania zakażenia HIV, zwłaszcza u dzieci poniżej 18. miesiąca życia urodzonych przez matki z HIV, u których obecność przeciwciał matczynych uniemożliwia stosowanie testów diagnostycznych opartych na przeciwciałach ( ELISA ) . Testowanie puli wirusowego RNA skraca okres okienka do mediany 17 dni (95% CI, 13-28 dni). Chociaż stosowanie tego testu do diagnozy nie jest standardem postępowania, w społecznościach o wysokiej częstości występowania HIV test ten ma znacznie lepszą negatywną wartość predykcyjną w porównaniu z testami trzeciej i czwartej generacji do wykrywania ostrych zakażeń wirusem HIV.

Niekorzystne skutki

Bezpieczne praktyki seksualne są zalecane dla osób z niską wiremią, tak samo jak dla wszystkich innych. Naukowcy kwestionowali, czy ludzie, którym powiedziano, że mają niski poziom wirusa, zareagują na te informacje, zmniejszając stosowanie bezpiecznych praktyk seksualnych. Od 2010 r. dalsze badania mogą wyjaśnić niepewność wokół tego pomysłu.

Historia

W styczniu 2008 roku naukowcy ze Szwajcarii opublikowali to, co można by nazwać Oświadczeniem Szwajcarskim , kontrowersyjnie argumentując, że osoby zakażone wirusem HIV 1) są leczone antyretrowirusowo, 2) mają miano wirusa poniżej 40 kopii na ml, i 3) nie mają innych chorób przenoszonych drogą płciową można założyć, że sami lub u swoich partnerów nie przenoszą choroby na zdrowych partnerów, którzy są nosicielami wirusa HIV. Pojawiły się obawy, że pomiary stężenia wirusa HIV na podstawie krwi w tamtym czasie mogą nie odzwierciedlać faktycznej liczby wirusów w nasieniu, a zatem Oświadczenie może zachęcać do niepotrzebnie ryzykownych praktyk seksualnych, chociaż autorzy Oświadczenia argumentowali, że wzięli to pod uwagę.

15 czerwca 2010 r. FDA zatwierdziła pierwszy test diagnostyczny zdolny do wykrywania antygenów HIV i przeciwciał HIV. Test kombinowany Abbott ARCHITECT HIV Ag/Ab, test czwartej generacji, ma zwiększoną czułość w wykrywaniu infekcji w ostrej fazie (w porównaniu z testami 1. i 3. generacji), kiedy układ odpornościowy wciąż wytwarza przeciwciała, a wirus jest replikacja bez kontroli, aw jednym badaniu była w stanie wykryć 83% takich infekcji.

Społeczeństwo i kultura

Osoba, która może być nieświadoma infekcji, jest w tym czasie wysoce zakaźna, ale może mieć ujemny wynik testu na obecność wirusa HIV przy użyciu testów wykrywających wyłącznie przeciwciała anty-HIV. Chociaż testowanie amplifikacji kwasów nukleinowych NAAT jest droższe i może zająć tydzień, niektórzy twierdzą, że nadal może być preferowanym sposobem badania przesiewowego w kierunku HIV.

Zaraźliwość

Im wyższa wartość wiremii, tym więcej elementów wirusowych znajduje się we krwi i innych płynach ustrojowych. Na przykład osoby z HIV są najbardziej zaraźliwe w najwcześniejszych (ostrych) stadiach zakażenia, czasami z milionami kopii wirusa HIV na centymetr krwi. Według niektórych szacunków większość transmisji wśród gejów w Wielkiej Brytanii ma miejsce podczas pierwotnej infekcji. Dzieje się tak, ponieważ w tej fazie odpowiedź immunologiczna wciąż się rozwija. Poziomy przeciwciał przeciwko wirusowi podczas ostrej infekcji są często zbyt niskie, aby można je było wykryć, co oznacza, że ​​test przeciwciał na wysoce zakaźną osobę może dać wynik ujemny.

Istnieje co najmniej jeden udokumentowany przypadek osoby zakażonej wirusem HIV z niewykrywalnym mianem wirusa, która zaraża jego partnera. Niemniej jednak, w dwóch ostatnich dużych badaniach par z niezgodnością serologiczną, w których pozytywny partner miał niewykrywalne miano wirusa, nie znaleziono powiązanych zdarzeń transmisji, pomimo przynajmniej częściowego stosunku płciowego bez zabezpieczenia wśród par. Trzecie badanie, HPTN 052 , wykazało jedno powiązane zdarzenie transmisji w grupie testowej 886 par, chociaż nie jest jasne, czy pierwotnie zarażony partner w tym przypadku osiągnął niewykrywalne miano wirusa w czasie transmisji.

Miano wirusa we krwi niedokładnie odpowiada miano wirusa w innych częściach ciała. Osoby z niewykrywalnym wiremią we krwi mogą nie mieć niewykrywalnego wiremii w innych płynach ustrojowych, takich jak nasienie lub wydzieliny pochwowe. W jednym z ostatnich badań, obejmującym 83 mężczyzn z niewykrywalną wiremią, 21 miało bardzo niewielkie, ale niewykrywalne wiremię w nasieniu. Nie jest jednak jasne, jak bardzo zwiększa to ryzyko transmisji.

Dystrybutorzy

Test kwasu nukleinowego

Testy kwasów nukleinowych są typowym sposobem pomiaru wiremii, w tym HIV.

Testy NAT HIV dla miana wirusa zatwierdzone i licencjonowane przez FDA do sprzedaży w Stanach Zjednoczonych
Nazwa testu Metoda molekularna Posługiwać się Zatwierdzony Producent
Test monitora Roche Amplicor HIV-1 PCR Wirusowe obciążenie 3/2/1999 Roche Molecular Systems, Inc. Pleasanton, Kalifornia
NucliSens HIV-1 QT NASBA Wirusowe obciążenie 19.11.2001 bioMerieux, Inc Durham, Karolina Północna
Zestaw do genotypowania wirusa HIV-1 Trugene i system sekwencjonowania DNA Open Gene Genotypowanie HIV-1 Monitorowanie pacjenta 24.04.2002 Siemens Medical Solutions Diagnostics Berkeley, Kalifornia
System do genotypowania ViroSeq HIV-1 z analizatorem genetycznym 3700 Genotypowanie HIV-1 Monitorowanie pacjenta 6.11.2003 Celera Diagnostics Alameda, Kalifornia
Versant HIV-1 RNA 3,0 bDNA Monitorowanie pacjenta 9/11/2002 Siemens Medical Solutions Diagnostics Berkeley, Kalifornia
Test Procleix Ultrio TMA (komercyjna odmiana NASBA)

Trzy kroki do testu Procleix Ultrio są wykonywane w jednej probówce. Pierwszym etapem jest przygotowanie próbki, drugim amplifikacja za pośrednictwem transkrypcji (TMA), a trzecim test ochrony przed hybrydyzacją (HPA) przy użyciu jednoniciowych komplementarnych znakowanych sond chemiluminescencyjnych . Luminometr służy do pomiaru sygnału. Czułość tego testu wynosi 98%.

Jakościowe wykrywanie RNA HIV-1 i RNA wirusa zapalenia wątroby typu C (HCV) od dawców ochotników pełnej krwi i składników krwi, badanie przesiewowe żywych dawców narządów oraz badanie próbek krwi w celu zbadania dawców nieżyjących. Badanie przesiewowe HBV pojedynczych próbek i próbek zbiorczych. 10.03.2006 Gen-Probe San Diego, CA USA Licencja 1592 Chiron Corporation
Ludzki wirus niedoboru odporności, typ 1 (HIV-1) Test odwrotnej transkrypcji (RT) łańcuchowej reakcji polimerazy (PCR) PCR Jakościowe wykrywanie RNA HIV-1 w pulach ludzkiego osocza źródłowego 31.01.2007 Usługi plazmowe BioLife, LP Deerfield, IL US Licencja 1640
Zestaw do amplifikacji wirusa HIV-1 firmy Abbott w czasie rzeczywistym RT-PCR

Czułość (zakres liniowy) tego testu wynosi od 40 kopii/ml do 1010 kopii/ml. Używane są dwie sondy. Sonda HIV-1 jest znakowana cząsteczką fluorescencyjną i wiąże się kowalencyjnie z końcem 5'. Druga sonda jest krótkim oligonukleotydem z cząsteczką wygaszacza na końcu 3' przyłączoną komplementarnie do końca 5' sondy HIV-1. Jeśli sonda HIV-1 znajdzie i przyłączy się do celu HIV, cząsteczka wygaszacza jest uwalniana i mierzona jest wynikająca z tego emisja fluorescencyjna. Fluorescencja jest proporcjonalna do logarytmu ilości wirusa w próbce.

Oznaczanie ilościowe HIV-1 5/11/2007 ABBOTT Molecular, Inc Des Plaines, IL
Test COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan HIV-1 PCR

Wykorzystuje transfer energii rezonansu fluorescencyjnego (FRET) w celu usprawnienia zautomatyzowanego RT-PCR. W reakcji FRET sonda donorowa i akceptorowa wymieniają energię wzbudzenia w zakresie 1-5 par zasad (pz) na sekwencjach docelowych. Energia emitowana jest w postaci ciepła lub fluorescencji. Sondy są zaprojektowane tak, aby wiązały się 1-5 pz od siebie. Emisja energii jest proporcjonalna do stężenia cząsteczek wirusa. Zakres liniowy dla tego testu wynosi 48 kopii/ml krwi.

Oznaczanie ilościowe HIV-1 5/11/2007 Roche Molecular Systems, Inc Pleasanton, Kalifornia

Testy nie oparte na kwasach nukleinowych

ExaVir™ Load w wersji 3 firmy Cavidi AB jest testem w dużej mierze ręcznym, który posiada europejskie zatwierdzenie (znak CE) do użytku klinicznego i jest również używany do monitorowania wiremii. Aktywność odwrotnej transkryptazy związanej z wirusem (RT) jest mierzona i dlatego może wykrywać wszystkie typy i podtypy wirusa HIV. Technologia nie wymaga wyrafinowanych laboratoriów.

Bibliografia

Zewnętrzne linki