Albumina surowicy bydlęcej - Bovine serum albumin

albumina
Identyfikatory
Organizm	Bos taurus (krowa domowa)
Symbol	ALBA
Entrez	280717
HomoloGene	105925
RefSeq (mRNA)	NM_180992
RefSeq (Prot)	NP_851335
UniProt	P02769
Inne dane
Chromosom	6: 91,54 - 91,57 Mb
Szukaj Struktury Model szwajcarski Domeny InterPro

Albumina surowicy bydlęcej ( BSA lub „Frakcja V” ) to białko albuminy surowicy pochodzące od krów. Jest często używany jako standard stężenia białka w eksperymentach laboratoryjnych.

Pseudonim „Frakcja V” odnosi się do albuminy będącej piątą frakcją oryginalnej metodologii oczyszczania Edwina Cohna, która wykorzystywała zróżnicowaną rozpuszczalność białek osocza . Manipulując stężeniami rozpuszczalników, pH, poziomami soli i temperaturą , Cohn był w stanie wyciągnąć kolejne „frakcje” osocza krwi . Proces został najpierw skomercjalizowany z albuminą ludzką do użytku medycznego, a później zaadaptowany do produkcji BSA.

Liofilizowana albumina surowicy bydlęcej

Nieruchomości

Pełnowymiarowe białko prekursorowe BSA ma długość 607 aminokwasów (AA). N-końcową 18-resztowy peptyd sygnałowy jest odcinany z białka prekursorowego na wydzieliny, a więc początkowy produkt białkowy zawiera 589 reszt aminokwasowych. Dodatkowe sześć aminokwasów jest ciętych, aby uzyskać dojrzałe białko BSA, które zawiera 583 aminokwasy.

Właściwości fizyczne BSA:

• Liczba reszt aminokwasowych: 583
• Masa cząsteczkowa: 66 463  Da (= 66,5 kDa)
• punkt izoelektryczny w wodzie o temperaturze 25 ° C: 4,7
• Współczynnik ekstynkcji 43,824 M ⁻¹ cm ⁻¹ przy 279 nm
• Wymiary: 140 × 40 × 40 Å (wydłużona elipsoida, gdzie a = b <c)
• pH 1% roztworu: 5,2-7
• Skręcalność optyczna: [α] ₂₅₉ : -61 °; [a] ₂₆₄ : -63 °
• Promień Stokesa (r _s ): 3,48 nm
• Stała sedymentacji, S _{20, W} × 10 ¹³ : 4,5 (monomer), 6,7 (dimer)
• Stała dyfuzji, D _{20, W} × 10 ⁻⁷  cm ² / s: 5,9
• Częściowa objętość właściwa, V ₂₀ : 0,733
• Lepkość istotna, η: 0,0413
• Współczynnik tarcia, f / f0: 1,30
• Przyrost współczynnika załamania (578 nm) × ^10-3 : 1,90
• Absorbancja optyczna, A ^{279 nm} _{1 g / l} : 0,667
• ε ₂₈₀ = 43,824 mM ⁻¹ cm ⁻¹
• Średnia rotacja pozostałości, [m '] ₂₃₃ : 8443
• Średnia eliptyczność pozostałości: 21,1 [θ] _{209 nm} ; 20,1 [θ] _{222 nm}
• Szacunkowa a-helisa,%: 54
• Szacunkowa forma b,%: 18

Aplikacje

BSA ma liczne zastosowania biochemiczne, w tym testy ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay), immunobloty i immunohistochemię . Ponieważ BSA jest małym, stabilnym, umiarkowanie niereaktywnym białkiem, jest często używane jako bloker w immunohistochemii. Podczas immunohistochemii, która jest procesem wykorzystującym przeciwciała do identyfikacji antygenów w komórkach, skrawki tkanek są często inkubowane z blokerami BSA w celu wiązania niespecyficznych miejsc wiązania. To wiązanie BSA z nieswoistymi miejscami wiązania zwiększa szansę, że przeciwciała będą wiązać się tylko z interesującymi antygenami. Bloker BSA poprawia czułość poprzez zmniejszenie szumu tła, ponieważ miejsca są pokryte umiarkowanie niereaktywnym białkiem. Podczas tego procesu minimalizacja niespecyficznego wiązania przeciwciał jest niezbędna, aby uzyskać najwyższy stosunek sygnału do szumu. BSA jest również stosowany jako składnik odżywczy w kulturach komórkowych i drobnoustrojach. W trawieniu restrykcyjnym BSA stosuje się do stabilizacji niektórych enzymów podczas trawienia DNA i do zapobiegania przywieraniu enzymu do probówek reakcyjnych, końcówek pipet i innych naczyń. To białko nie wpływa na inne enzymy , że nie trzeba go do stabilizacji. BSA jest również powszechnie stosowane do określania ilości innych białek, porównując nieznaną ilość białka ze znanymi ilościami BSA (patrz test białkowy Bradforda ). BSA jest stosowany ze względu na jego zdolność do zwiększania sygnału w testach, brak wpływu na wiele reakcji biochemicznych i niski koszt, ponieważ duże jego ilości można łatwo oczyścić z krwi bydlęcej, produktu ubocznego przemysłu bydlęcego. Innym zastosowaniem BSA jest to, że można go użyć do tymczasowej izolacji substancji, które blokują aktywność potrzebnego enzymu, utrudniając w ten sposób reakcję łańcuchową polimerazy (PCR). BSA jest szeroko stosowany jako szablon do syntezy nanostruktur.

BSA jest również głównym składnikiem płodowej surowicy bydlęcej , powszechnej pożywki do hodowli komórkowych.

Zobacz też

• Dopuszczalne dzienne spożycie
• Alergia na białko
• Albumina surowicy ludzkiej
• Albumina surowicy

Bibliografia

Dalsza lektura

Linki zewnętrzne

• Surowica + albumina, + bydło w US National Library of Medicine Medical Subject Headings (MeSH)